Методы количественного определения гормонов (часть 1)

Желательно, чтобы во всех случаях определение гормонов было основано не на субъективных оценках, а на функциональных или структурных изменениях, которые могут быть измерены с помощью приборов. При этом следует использовать нормальное физиологическое действие гормона, а не фармакологические эффекты, вызываемые его чрезмерно большими дозами.
Одним из наиболее ранних способов определения концентрации гормона в крови или экстракте был биологический метод (метод биотестов). Он основан на разумном предположении, что эффект гормона прямо пропорционален его количеству. В качестве примера можно привести определение гормона роста, выделяемого гипофизом. Прямой мерой его количества служит скорость роста животного. В принципе все очень просто; однако на практике приходится предварительно удалять у животного его собственный гипофиз (производить гипофизэктомию), чтобы у него не было эндогенного (собственного) гормона роста. Животное не переносит такого вмешательства, если ему не вводить остальные гормоны, секретируемые в норме гипофизом. Поскольку конечная цель исследования — измерение роста, понятно, что можно использовать только молодых животных. При этом должно быть сведено до минимума или исключено действие других факторов, влияющих на рост.
А как быть в том случае, если гормон действует только в присутствии других веществ или его эффект зависит от времени суток или от пола животного? При проведении таких исследований могут возникать большие трудности, но они все же преодолимы. Если все ограничения учтены и сведены до минимума, биологический метод пригоден для использования.
Большому числу одинаковых животных одного пола (обычно самкам) вводят различные дозы чистого гормона роста, а некоторым из них — исследуемый материал. Через несколько дней животных забивают и измеряют у них ширину эпифизарного хряща большеберцовой кости. Сравнивая эффект инъекции исследуемого материала и различных доз гормона роста, можно определить содержание этого гормона в изучаемом образце.
Очевидно, что этот метод занимает много времени; к тому же в приведенном описании опущены многие детали и дополнительные предосторожности. Тем не менее с помощью биологических методов тестирования in vivo (на целых животных) или in vitro (на изолированных тканях) были получены ценные сведения о концентрации гормонов в крови и тканях в различных условиях. Другими примерами подобных биотестов могут служить измерение концентрации глюкозы в крови для определения инсулина, анализ изменений в щитовидной железе для оценки активности тиреотропного гормона, измерение подроста половых желез как метод количественного определения различных половых гормонов.
При использовании биотестов серьезные затруднения создает их низкая чувствительность. Для каждого определения требуется довольно большое количество очищенного экстракта, содержащего гормон, а для того, чтобы результаты были достоверными, опыт необходимо повторять многократно. В связи с этим были разработаны другие методы анализа, более чувствительные.

• Удаление, реимплантация и экстракты гормонов
• Что такое гормон?
• Контроль внешней среды и продуктов животноводства (часть 4)
• Контроль внешней среды и продуктов животноводства (часть 3)
• Контроль внешней среды и продуктов животноводства (часть 2)
• Контроль внешней среды и продуктов животноводства (часть 1)
• Особенности заживления ран у облученных животных (часть 4)
• Особенности заживления ран у облученных животных (часть 3)
• Особенности заживления ран у облученных животных (часть 2)
• Особенности заживления ран у облученных животных (часть 1)