Цитограммы кроветворных органов и их клиническое значение

Цитоморфологическое исследование кроветворных органов имеет большое дифференциально-диагностическое значение при многих заболеваниях, всевозможных физиологических и патологических состояниях организма, сопровождающихся изменениями в периферической крови. Прижизненное изучение пунктатов гемопоэтических органов позволяет достоверно идентифицировать временные реактивные изменения периферической крови от стабильных, обусловленных патологическими процессами.
Изучение характера функционального состояния гемопоэза и его перестройки с учетом картины периферической крови и клинической симптоматики помогает разобраться в сложных диагностических ситуациях (например, выявить природу анемии, ранее оставшуюся неясной). В ряде случаев цитограммы кроветворных органов позволяют диагностировать различные заболевания кроветворной системы, когда по клинической симптоматике и картине периферической крови не представляется возможным установить природу патологического процесса.
Цитограммы — процентное соотношение ядерных клеточных элементов пунктата того или иного кроветворного органа, полученное путем подсчета в окрашенных мазках 500—1000 клеток. Цитограмма костного мозга получила название миелограммы, лимфатических узлов — аденограммы и селезенки — силенограммы. У здоровых животных в нормальных условиях процентное соотношение клеточных элементов в том или ином органе остается постоянным. При раздражении этих органов меняется число тех или иных видов клеток, а при заболеваниях системы крови происходят качественные и количественные изменения органа, которые выражаются одновременно и в появлении видоизмененных, патологических клеточных элементов. Исходя из этого, выведение цитограмм необходимо начинать с просмотра окрашенных препаратов под малым увеличением, что позволяет определить качество их окрашивания, богатство пунктата ядерными элементами, возможность наличия в мазках гигантских или групповых скоплений атипичных клеток. Последующее изучение производят под иммерсионной системой.
Миелограмма имеет сравнительно важное значение для определения состояния органов гемопоэза, так как в костном мозге развивается абсолютное большинство видов клеток. Придавая большое значение исследованию костного мозга у животных, С. А. Ивановский указывай что пункция костного мозга позволяет глубже понимать процессы, протекающие в организме, дает возможность получать такие данные, которые не выявляются другими методами исследования.
В костном мозге происходит образование клеток эритробластического, миелобластического, монобластического и мегакариобластического ростков. Барьерная функция костного мозга в норме обеспечивает выход в периферическую кровь только зрелых элементов: эритроцитов, нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов и тромбоцитов. При патологиях и реактивных состояниях костного мозга может нарушаться функция элиминации, обусловливая выход в кровь незрелых или патологических форм красного или белого ростка кроветворения.
Внутри каждого ростка гемопоэза отмечается гармоничное вызревание клеток от более молодых до зрелых форм, которые по своим специфичным морфологическим признакам поддаются идентификации. Однако при патологических изменениях костномозгового кроветворения происходят нарушение процентного соотношения между отдельными клеточными элементами, элиминация в кровь молодых форм нормального гемопоэза, появление видоизмененных клеток, обусловленное часто опухолевыми разрастаниями в костном мозге. При апластических состояниях костного мозга и жировом его перерождении значительно уменьшается количество клеточных элементов в пунктате.
Формулу миелограммы у здоровых людей впервые предложил М.И. Арипкин, который считал, что без нее нельзя получить ясного представления о патологических изменениях костного мозга при том или ином, болезненном процессе.

Выведением миелограмм у животных занимались небольшое число исследователей. Были предложены миелограммы у лошадей, крупного рогатого скота, овец, свиней и других видов животных. Между миелограммами, предложенными различными авторами, имеется определенное несоответствие. Это объясняется отсутствием единых терминологии и методики подсчета, а также чрезвычайной вариабельностью элементов пунктата. Исходя из этого, Г.А. Алексеев предлагает каждому автору, занимающемуся систематическим изучением пунктата костного мозга, привести свою норму, основанную на собственном материале. Следуя этому правилу, нами па большом фактическом материале выведена миелограмма здоровых коров с указанием среднестатистических показателей и пределов колебания по каждому виду клеток (табл. 12). Учитывая большую амплитуду колебания (минимум—максимум) процентного содержания каждого элемента, «нормальной» миелограмме придают лишь относительное значение. В таблице 13 представлены миелограммы некоторых других видов животных, по данным различных авторов.

Для оценки гемопоэза в целом, его преимущественной направленности в сторону лейкопоэза или эритропоэза, И. А. Кассирский; Г. А. Алексеев предлагают пользоваться показателем лейко-эритробластического отношения. Этот показатель отражает процентные соотношения клеточных элементов лейкобластического и эритробластического ростков, полученные при подсчете миелограммы. В норме отношение лейко: эритро (Л:Э) составляет у крупного рогатого скота 1,0:1,2; у лошадей — 1,1:1,0; у свиней — 2,1:1,0. Уменьшение или увеличение этого индекса отражает гиперпластическое или пластическое состояние того или иного ростка костномозгового кроветворения.
Для оценки функционального состояния кроветворения в целом и парциально Г.А. Алексеев пользуется введенным им принципом «закона гармонического распределения костномозговых элементов по степени их дифференциации». Согласно этому закону процентное содержание элементов в одном и том же ряду возрастает соответственно степени дифференциации элементов этого ряда, т. е. чем ниже по филогенетической лестнице расположен тот или иной элемент, тем ниже его процентное содержание в костномозговой миелограмме.
Если расположить все клеточные элементы по степени их дифференциации, то окажется, что процентное содержание каждого элемента того или иного вида клеток в этом ряду выше процентного содержания предыдущего элемента и ниже процентного содержания последующего. Например, процент нейтрофильных миелоцитов превышает процент промиелоцитов и ниже процента юных форм. Поправка может быть только в отношении сегментоядерных лейкоцитов, число которых может быть ниже палочкоядерных вследствие вымывания зрелых лейкоцитов в периферическую кровь. Точно также и среди эритробластов наблюдаются последовательные градации: содержание базофильных эритробластов выше содержания проэритробластов и ниже гемоглобинсодержащих эритробластов, среди последних преобладают более зрелые, т. е. ортохромные формы. В большинстве миелограмм отмечается так называемый провал в гранулоцитарном ряду, особенно в группе метамиелоцитов, содержание которых бывает ниже содержания миелоцитов. В патологических миелограммах наблюдается полная дисгармония в распределении клеточных элементов: при лейкозах, извращениях эритропоэза, анемиях и т. д.
Таким образом, значение изучения количественных соотношений элементов стернального пунктата заключается в том, что он конкретизирует паши представления о реактивных сдвигах гемопоэза и дает возможность выявить преобладание тех или иных фаз созревания белой и красной крови.
Аденограмма. Цитоморфологическое исследование пунктатов лимфатических узлов позволяет определить небольшие количественные и качественные изменения в цитограмме, обнаружить чуждые нормальному лимфоузлу клеточные элемента.
В лимфатических узлах происходят образование и развитие клеток лимфобластического ростка, поэтому до 95—98% клеточных элементов аденограммы составляют лимфоидные клетки разной степени зрелости (табл. 14). Помимо лимфоидных клеток в мазках из пунктатов лимфоузлов обнаруживают также плазматические клетки - конечная стадия развития В-лимфоцитов, тучные тканевые клетки, макрофаги, липофаги, а также зрелые клеточные элементы крови (нейтрофилы, эозинофилы и моноциты).

Лимфоциты пунктата в отличие от лимфоцитов крови имеют сравнительно меньшие размеры и уплотненный хроматин ядра. Пролимфоциты отличаются от лимфоцитов несколько большими размерами, более светлой и менее компактной структурой хроматина ядра. Лимфобласты имеют нежную структуру хроматина ядра с наличием одного ядрышка, голубую цитоплазму с перинуклеарной зоной просветления.
При реактивных лимфаденитах среди множества лимфатических клеток обнаруживаются крупные элементы — иммунобласты с нежно-петлистой структурой хроматина ядра и наличием ядрышек. Цитоплазма базофильная. Обнаруживаются также крупные макрофаги, в цитоплазме которых фагированы остатки клеточных образований, плазматические клетки разной степени зрелости, тучные клетки. При опухолевых поражениях лимфоузлов в пунктатах обнаруживают дим-фосаркомные или ретикулосаркомные клетки разнообразных формы, размера, цвета цитоплазмы и ядра, с наличием множественных нуклеол, со структурой хроматина ядра от глыбчатой до нежно-петлистой. Среди них встречаются многоядерные и гигантские клеточные элементы, патогномоничные для туберкулеза (клетки Лангханса), лимфогра-пуломатоза (клетки Березовского — Штернберга) и др. Исследования пунктата лимфоузлов имели диагностическое значение при реактивных лимфаденитах, туберкулезе, актиномикозе, лейкозах и опухолях.
Спленограмма. Цитограмма нормальной селезенки напоминает пунктат лимфоузла, где до 80—90% клеток составляют лимфоидные элементы разной степени зрелости (см. табл. 14). Помимо лимфоидных клеток обнаруживают тучные клетки, макрофаги и липофаги, плазматические клетки, клетки серозного покрова селезенки и соединительнотканные элементы. Среда лимфоидных клеток преобладают зрелые лимфоциты. При примеси крови в мазках обнаруживают также нейтрофилы, эозинофилы, базофилы и моноциты, видны скопления тромбоцитов.
При хроническом Лимфолейкозе лимфоидные клетки почти полностью вытесняют остальные виды клеток. В зависимости от течения болезни преобладают лимфоцитарные, пролимфоцитарные или лимфобластные клетки. При миелоидном лейкозе в пунктате обнаруживают клеточные элементы всех трех рядов костномозгового кроветворения вследствие миелоидной метаплазии селезенки. Единичные миелоидные клетки выявляют в селезенке и при нелейкемических заболеваниях с увеличением размеров селезенки: циррозе печени, спленомегалии различной этиологии, гемолитической анемии и др. При лимфогрануломатозе среди увеличенного числа нейтрофилов, эозинофилов и плазматических клеток обнаруживают гигантские клетки Березовского — Штернберга и их предстадий. При опухолевых формах лейкоза, лимфо- и ретикулосаркомах в мазках выявляют крупные опухолевые клетки, по морфологическим признакам соответствующие молодым бластным клеткам гемопоэза. Отмечаются их полиморфизм, наличие ядрышек в ядрах. Встречаются также многоядерные или гигантские клетки с интенсивно базофильной тенденцией к вакуолизации цитоплазмой. При туберкулезном поражении селезенки обнаруживают элементы туберкулезной гранулемы в виде скоплений эпителиоидных клеток, местами создающих представление о гигантских клеткаx Лангханса.
Пункция селезенки имеет важное диагностическое значение при различных формах гемобластозов, туберкулезной спленомегалии, амидоидозе, злокачественных опухолях, алейкемическом миелозе и др.

• Картина крови при некоторых физиологических состояниях и воздействиях внешней среды
• Гематологические показатели у сельскохозяйственных и домашних животных
• Функциональные методы выделения и идентификации Т- и В-лимфоцитов крови
• Определение фагоцитарной активности лейкоцитов
• Определение некоторых физико-химических показателей крови
• Методы лейкоконцентрации
• Подсчет лейкоцитарной формулы и других цитограмм
• Приготовление цитологических препаратов, методы их фиксации и окраски
• Пункция кроветворных органов (техника и инструментарий)
• Получение проб крови и отдельных их компонентов