11.11.2020

Изотахофорез


Изотахофорез (ИТФ) — метод разделения различных типов ионов по их подвижности в электрическом поле. При ИТФ все виды ионов мигрируют в одном направлении, образуя набор зон, находящихся в равновесном состоянии и перемещающимися с одинаковыми скоростями.

Теоретические основы метода

В основе метода ИТФ лежит система, состоящая из трех различных электролитов, объединенных общим противоионом:

  • ведущий электролит, содержащий анионы с наиболее высокой электрофоретической подвижностью, располагается в анодной области;
  • замыкающий электролит, содержащий анионы с минимальной подвижностью, располагается в катодной области;
  • смесь электролитов анализируемой смеси, содержащая анионы с промежуточной подвижностью.

Если через эту систему пропустить электрический ток, то анионы расположатся последовательно в соответствии с их электрофоретической подвижностью, ведущий в области анода, замыкающий в области катода, остальные между ними в виде узких зон с четкими концентрационными границами. Ширина отдельных зон по завершении процесса соответствует абсолютному количеству в смеси того или иного аниона.

Поскольку отдельные зоны располагаются последовательно. они практически соприкасаются, поэтому в исследуемый образец вносят буфер, содержащий анион с промежуточной подвижностью, зона которого встроится в полученную последовательность и раздвинет зоны исследуемых анионов. Эти вспомогательные зоны называются спейсерами — разделителями, функции которых выполняют амфолиты-носители, используемые в методе ИЭФ. особенностью метода ИТФ является то, что процесс сопровождается концентрированием зон, эффект от которого приводит к разрешению, сравнимому и даже превосходящему разделение методом ИЭФ. Результаты разделения смесей методом ИТФ фиксируются на ленте самописца в виде графика измерения трех параметров:

  • интегральная кривая тепловыделения: по этой кривой можно определить разницу температур между соседними зонами, что служит мерой градиента напряженности поля, то есть разницы электрофоретических подвижностью двух ионов
  • дифференциальная кривая тепловыделения: длина отрезков этой кривой соответствуют ширине зоны вещества, а также служит мерой абсолютного количества вещества в пробе
  • кривая поглощения в УФ-свете: длина отрезков этой кривой соответствует значению экстинкции вещества. Зная коэффициент молярной экстинкции вещества, можно определить абсолютное содержание вещества в пробе, а также вычислить его концентрацию в зоне.

Приборы для изотахофореза

Аналитический изотахофорез проводят в капиллярном приборе для изотахофореза, в тефлоновом капилляре с внутренним диаметром 0,5 мм.

Препаративный изотахофорез проводят в колонке с полиакриламидным гелем.

Применение изотахофореза

  • Аналитическое разделение (мкг) пептидов, белков, нуклеотидов, органических кислот, ионов металлов (частично изотопов) с высоким разрешением.
  • Препаративное разделение белков (г).
  • Накопление в виде узкой зоны следовых количеств веществ (мкг) из больших объемов пробы вследствие эффекта концентрирования.
  • Определение электрофоретической подвижности.

  • Похожие новости:

    NICA

    NICA
    NICA (англ. Nuclotron-based Ion Collider fAcility) — сверхпроводящий коллайдер протонов и тяжёлых ионов, строящийся с 2013 года на базе Лаборатории физики высоких энергий (ЛФВЭ) им. В. И. Векслера и

    Фотографический метод

    Фотографический метод
    Фотографический метод — метод изучения различных явлений происходящих в природе, заключающийся в запечатлении явления на фотографии или серии фотографий, которые в дальнейшем подвергаются анализу со

    Родники горы Весёлой

    Родники горы Весёлой
    Родники горы Весёлой или Худяковские родники — месторождение природной питьевой воды, расположено в Иркутской области, южнее села Худякова. В мае 1981 года обрели статус государственного памятника

    Виды соединения костей у животных (часть 1)

    Виды соединения костей у животных (часть 1)
    Непрерывный вид соединений костей - Junctura fibrosa et cartilaginea. Этот вид соединения костей имеет большую упругость, прочность и очень ограниченную подвижность. В зависимости от строения ткани,
    Комментариев пока еще нет. Вы можете стать первым!

    Добавить комментарий!

    Ваше Имя:
    Ваш E-Mail:
    Введите два слова, показанных на изображении: *
    Популярные новости
    Что стоит принять во внимание прежде, чем вступить в СРО строителей
    Что стоит принять во внимание прежде, чем вступить в СРО строителей
    Вступление в СРО строителей в наше время – дело необходимое. Членство поможет повысить качество...
    Виды окон ПВХ и их преимущества
    Виды окон ПВХ и их преимущества
    В конце девяностых годов прошлого века в нашей стране появились пластиковые окна. Они сразу же...
    Особенности проведения отделки балкона
    Особенности проведения отделки балкона
    Балкон — это особое пространство квартиры, которое отличается небольшими квадратными метрами и...
    Что такое предпроектная документация и для чего она нужна
    Что такое предпроектная документация и для чего она нужна
    Прединвестиционная стадия характеризуется возможностью создания конечного результата. Это не...
    Особенности мобильных офисных перегородок. Основы правильной организации рабочего пространства
    Особенности мобильных офисных перегородок. Основы правильной организации рабочего пространства
    Мобильные офисные перегородки — это современные решения, помогающие быстро и эффективно зонировать...
    Обзор советов по уходу за обивкой мягкой мебели дома: краткое руководство
    Обзор советов по уходу за обивкой мягкой мебели дома: краткое руководство
    Неминуемо на новеньком диване или любимых креслах появится ненавистное пятно. Многие народные...
    Как обустроиться в однокомнатной квартире?
    Как обустроиться в однокомнатной квартире?
    Далеко не каждый проживает в большом доме или многокомнатной квартире. Как же обустроить интерьер...
    Все новости