» » Определение резервной щелочности и каротина в крови и обнаружение кетоновых тел в молоке (моче)

Определение резервной щелочности и каротина в крови и обнаружение кетоновых тел в молоке (моче)

31.03.2015

Методические указания. Химические анализы на определение тех или иных веществ в крови, молоке, сыворотке крови требуют лабораторных навыков по качественному и количественному анализу. Выполнение заданий студенты производят подгруппами по 2-4 чел. Ниже приведены наиболее простые и доступные методы их выполнения.
Место работы: кабинет-лаборатория кафедры.
Подопытные животные: корова.
Приборы и материалы:
- для выполнения первого задания: микробюретки, химические стаканчики, пипетки до одного миллилитра, сантинормальный раствор соляной кислоты, децинормальный раствор едкого натрия;
- для второго - пробирки, градуированная пипетка, фарфоровая чашка, спиртовка, спирт 96°, петролейный эфир, чистый бензин, дистиллированная вода;
- для третьего - ступка, фильтровальная бумага, реактивы нитропруссид натрия, безводный углекислый натрий, сульфат аммония.
Задания:
1. Определить щелочной резерв крови.
2. Определить количество каротина в сыворотке крови.
3. Исследовать молоко и мочу на наличие кетоновых тел.
Порядок выполнения заданий.
Определение щелочного резерва крови производится по следующей методике: к 10 мл сантинормального раствора соляной кислоты прибавляют 0,2 мл крови. Смесь взбалтывают и титруют из микробюретки децинормальным раствором едкого натрия до появления мути и выпадения хлопьев.
Вычтя из единицы количество израсходованной щелочи, опустив нуль и помножив разность на 20, получим показатель щелочности в миллиграмм-процентах (мг%) в 100 мл крови.
Пример. Израсходовано 0,69 мл щелочи. Вычисляем щелочность крови: 1 - 0,69 = 0,31. Исключаем нуль и 31 - 20 = 620 (мг%).
Коэффициент 20 получается из следующего расчета: 0,01 мл децинормального раствора едкого натрия содержит 0,04 мг NaOH; 0,2 мл крови составляет Vsoo часть от 100 мл крови; увеличиваем 0,04 в 500 раз и получаем число 20.
В норме щелочной резерв колеблется в пределах (в мг%): у крупного рогатого скота 460-540, у овец 460-520, у лошадей (рабочих) 540-580.
Определение каротина в сыворотке крови. В сухую пробирку наливают 0,2 мл свежей сыворотки, крови.
Прибавляют 4 мл 96° спирта и тщательно взбалтывают.
Приливают 2 мл петролейного эфира (или чистого бензина с температурой кипения 16°). Содержимое хорошо перемешивают и оставляют на несколько минут в покое.
Затем по каплям приливают из пипетки дистиллированную воду - 1,5-2 мл. При этом в пробирке происходит разделение эфирного и спиртового слоя. Каротин экстрагируется эфиром и окрашивает верхний слой в слегка желтовато-зеленый цвет.
Из верхнего эфирного слоя берут градуированной пипеткой 1 мл жидкости и по каплям испаряют ее на дне фарфоровой чашечки (предварительно слегка нагретой). Каплю необходимо опускать каждый раз на одно и то же место.
С появлением на дне чашечки едва заметного желтого кольца испарение прекращают и отмечают количество использованной жидкости. Появление кольца указывает на то, что в испарившемся количестве экстракта содержится 0,04 микрограмма, или 0,00004 мг каротина. Отсюда содержание каротина в 100 мл сыворотки в мг% вычисляют по формуле

Определение резервной щелочности и каротина в крови и обнаружение кетоновых тел в молоке (моче)

где X - содержание каротина в 100 мл сыворотки (мг%);
0,04 - содержание каротина в испарившемся количестве сыворотки в гаммах (микрограммах);
2 - количество миллиметров петролейного эфира;
К - количество миллилитров испарившегося эфирного экстракта до получения желтого кольца на дне чашечки;
0,2 - количество испытуемой сыворотки;
100 - приведение содержания каротина в 100 мл сыворотки; 1000 - перевод граммов в миллиграммы.
Для вычисления содержания каротина пользуются специальной шкалой П. Т. Лебедева.
Определение кетоновых тел в сыворотке крови, в моче и в молоке. Кетоновые тела (бета-оксимасляная и ацетоуксусная кислоты, ацетон) образуются главным образом в печени и в меньшей степени в почках, а у жвачных в стенке преджелудков и молочной железе в результате окисления жирных кислот, а также в процессе обмена углеводов и некоторых аминокислот. При нормальном обмене веществ в организме ацетоуксусная кислота распадается на углекислый газ и воду (при включении в цикл три-карбоновых кислот), бета-оксимасляная кислота окисляясь превращается в высшие жирные кислоты, которые идут на синтез нейтральных жиров и других липидов.
Для выявления кетоновых тел проводят качественную реакцию, используя реактив Лестраде.
Обеспечение: испытуемая сыворотка, моча и молоко от животных, реактив Лестраде (натрия нитропруссида 1 г + натрия углекислого безводного 20 г + аммония сульфата 20 г).
Реактивы смешивают и растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка, который затем хранят в тёмной посуде с плотно притёртой пробкой.
Ход определения кетоновых тел в сыворотке крови: на фильтровальную бумагу на кончике скальпеля помещают небольшое количество порошка (реактив Лестраде) и вносят пипеткой 1-3 капли сыворотки крови. При наличии в сыворотке крови свыше 10 мг% кетоновых тел через 40-60 секунд появляется окрашивание от розового до темно-фиолетового цвета.
Клиническое значение: кетоновые тела в небольших количествах имеются у здоровых животных. Повышенное содержание кетоновых тел связывают прежде всего с недостаточной обеспеченностью организма энергией (глюкозой), что бывает при белковом, жировом перекорме, ожирении, недостатке легкопереваримых углеводов в рационе, истощении и кахексии, нарушениях эндокринной регуляции метаболизма (сахарный диабет), при поражении желез внутренней секреции, гидрокортикоидизме, тиреотоксикозе.
В норме в сыворотке крови кетоновых тел мг/100 мл у животных составляет: у крупного рогатого окота - 1-6, у овец - 5-7, у свиней - 0,5-2,5.
Техника определения кетоновых тел в моче и молоке: на белую кафельную плитку или в чашку Петри на листке белой бумаги насыпают небольшое количество реактива Лестраде, который затем увлажняют 2-3-мя каплями исследуемой мочи или молока. При положительной реакции (наличии кетоновых тел) реактив окрашивается от розового до темно-фиолетового цвета. Окрашивание реактива может наступить через 2-3 минуты.
Клиническое значение: в моче и молоке здоровых животных имеется небольшое количество кетоновых тел, которые не улавливаются качественными реакциями. Повышение (свыше 10 мг%) содержания в моче кетоновых тел называется кетонурией, а в молоке - кетонолактией. Кетонурию, кетонолактию наблюдают при длительном голодании, истощениях различного происхождения, сахарном мочеизнурении, злокачественных новообразованиях, после длительного наркоза, кетозе молочных коров, кетонурии суягных овец, листериозе, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах.


Имя:*
E-Mail:
Комментарий:

Новости
22.04.2019 Ароматы уличной пищи способны свести с ума. Особенно во время возвращения домой с работы. Однако следует помнить, что столь аппетитно пахнущий фастфуд может оказаться чрезвычайно вредным для вашего...

22.04.2019 Самостоятельно подобрать и купить корм для кур несушек – оптимальный вариант для тех хозяев, которые хотят получать качественный продукт длительное время....

22.04.2019 Винтовыми компрессорами называют машины, характеризующиеся внушительными размерами и весьма обширной сферой применения. В них процедура сжатия среды осуществляется благодаря вращению нескольких...

20.04.2019 Говоря о том, какие же деревья лучше всего высаживать в весенний период, важно принимать во внимание особенности местности, где вы проживаете. К примеру, для южных частей нашей страны высадку лучше...

20.04.2019 На территории нашего государства и за рубежом сегодня продолжают активно выращивать подсолнух. Из-за больших масштабов выращивания такой культуры возникает потребность в применении особых...

20.04.2019 Бывают ситуации, когда нужно уехать, а возможности брать с собой братьев меньших нет, тогда приходят на помощь сервисы по передержке животных....

19.04.2019 Гидравлический молот или же, сокращённо, гидромолот, по сути, - это более современный вариант сваебойного агрегата, при помощи которого происходит заглубление в грунт свай для будущего основания....

17.04.2019 Грецкий орех является абсолютно не капризным и устойчивым к низким температурным режимам растением, вот почему многие садоводы высаживают его на своих земельных наделах....

17.04.2019 Наверняка все люди знают, что всхожесть разнообразных культур, как садовых, так и огородных, определяется большим количеством факторов, среди них количество солнечных лучей, а также характеристики...

10.04.2019 Многие люди в наше время имеют домашних животных. В этом нет ничего удивительного, так как домашние животные способны принести настоящую радость человеку....

10.04.2019 Форзиция или форсайтия очень выносливое растение. В природе есть шесть видов этого листопадного кустарника. И хотя родом он из Азии, но прекрасно чувствует себя в Европе, особенно в южной ее части....

09.04.2019 Наконец-то мы дождались тепла, когда можно выезжать на пикники подолгу гулять в парках. Однако такая хорошая погода может принести не только положительные эмоции от прогулок с собакой. Потепление...

09.04.2019 Ни для кого не секрет, что раньше редис называли наиболее незамысловатым в агротехнике овощем. Его нужно лишь посадить, полить, защитить от крестоцветных блошек, а спустя несколько недель можно...

04.04.2019 Различное лабораторное оборудование используется для различных целей, покупать его следует в специализированных магазинах. Однако надо понимать необходимость именно правильного выбора....

03.04.2019 Пресс-формами называют приспособления, при помощи которых можно получать продукцию разнообразной конфигураций из металлического сырья, пластмассы, резины и иных материалов под влиянием значительного...

03.04.2019 Трактор вполне заслужено можно назвать уникальным человеческим изобретением, благодаря которому появилась возможность механизировать самые трудоёмкие сельскохозяйственные процедуры, в то время как...

03.04.2019 Человечество знает и любит малину с незапамятных времён. Эта ягода обладает не только прекрасными вкусовыми характеристиками, но также лечебными свойствами. Как же высадить столь полезные ягоды на...

02.04.2019 На сегодняшний день в нашей стране действуют особые виртуальные платформы, специализирующиеся на продаже фермерских молочных и кисломолочных товаров. Наибольшим спросом в наши дни пользуется молоко,...

01.04.2019 На сегодняшний день с целью обследования животных активно применят оснащение, напоминающее стандартное медицинское оборудование. К примеру, с целью диагностики внутренних органов скотоводческой сферы...

© 2012 Все права защищены
При цитировании и использовании любых материалов ссылка на сайт обязательна

Яндекс.Метрика