Небольшое количество крови (2—3 капли) удается получить после прокола лапы или ампутации кончика хвоста (перед обрезанием хвост подогревают водой температурой 40—45 °C и дезинфицируют). После взятия крови рану на хвосте прижигают раствором йода. Можно получать кровь у мышей из хвостовых сосудов вакуумным способом Кончик хвоста смазывают ксилолом и отрезают его. На рану наносят каплю 5 %-го раствора цитрата натрия, после чего хвост вставляют в одно из отверстий специального баллончика, стенки которого парафинированы. Сквозь второе отверстие вакуумным насосом отсасывают воздух и при давлении 2,6—5,3 кПз в пробирку насасывают кровь. Указанным способом получают 0,2— 0,5 мл крови, сохраняя жизнь животного. Повторное взятие крови производят через 2—5 дней.
Н.Д. Пастернак (1976) разработал микрометодику забора крови у лабораторных мышей, которая позволяет повторно (по 5—6 paз в месяц) у одних и тех же мышей определять число эритроцитов, лейкоцитов, ретикулоцитов, тромбоцитов, содержание гемоглобина, лейкоцитарную формулу Для этого у фиксированного животного пунктируют хвостовую вену. Кровь в количестве 10 мкл набирают в микропипетку и быстро смешивают ее в первой пробирке (размер пробирки 77х10 мм) со 190 мкл 1 %-го раствора хлорида натрия, приготавливают мазки для подсчета лейкоцитарной формулы и ретикулоцитов. Затем на место укола наносят капли 6 %-го водного раствора ЭДТА и приготавливают мазок для подсчета тромбоцитов. Из первой пробирки берут 10 мкл взвеси крови и переносят ее во вторую пробирку, содержащую 90 мкл 3 %-го раствора хлорида натрия, получая разведение эритроцитов 1:200, пригодное для их подсчета. После этого в первую пробирку добавляют 10 мкл ледяной уксусной кислоты, сохраняя разведение крови 1:20, необходимое для подсчета лейкоцитов. Для подсчета лейкоцитов забирают 10 мкл гемолизата. Затем в первую пробирку с раствором ацетата гематина добавляют 1,8 мл 3 %-й уксусной кислоты, содержимое пробирки перемешивают и определяют содержание гемоглобина на ФЭКе при синем светофильтре (длина волны 453 нм).
Весьма удобным является взятие крови у мышей из ретроорбитального венозного сплетения. Техника взятия крови такая же, как и для крыс. Кончик микропипетки должен быть заточен под углом 45°. Микропипеткой у мышей можно взять кровь и из подъязычного венозного сплетения. Для этого левой рукой следует удерживать мышь за кожу шеи, слегка натягивая ее и сдавливая вены шеи. Пинцетом открывают рот, поднимают язык, прокалывают кончиком микропипетки слизистую в области подъязычного венозного сплетения, которое отчетливо выступает. В капилляр пипетки кровь поступает самотеком.
Пункция сердца. После выстригания шерсти и дезинфекции места укола животное наркотизируют и фиксируют животом кверху Пальпаторно определяют место наилучшего ощущения сердечного толчка и на 4—5 мм краниальнее от этого пункта у левого края грудины делают прокол Пункцией сердца удается получить до 0,5 мл крови.
Путем декапитации у мыши получают примерно 0,5—0,6 мл крови.
© 2012 Все права защищены
При цитировании и использовании любых материалов ссылка на сайт обязательна