Реакция нейтрализации. С помощью этого теста в исследуемой сыворотке крови выявляют антитела к вирусам лейкозо-саркомных групп А, В и С. Для постановки реакции используют цыплят, эмбрионы или культуры фибробластов эмбрионов кур, лучше всего типа С/О, с учетом типовой специфичности применяемых вирусов и сывороток кур. Перекрестная нейтрализация наблюдается только между вирусами, относящимися к одной и той же подгруппе.
Кофаль-тест. Установлено, что в культуральной жидкости куриных фибробластов, инфицированных вирусом лейкозов, содержится группоспецифический комплементфиксирующий антиген. Его выявляют в реакции связывания комплемента (РСК) с использованием сывороток крови сирийских (золотистых) хомячков или голубей, иммунизированных вирусом саркомы Рауса. В качестве испытуемого материала берут жидкость, в которой культивируются фибробласты куриных эмбрионов, аллантоисную жидкость или сыворотку крови взрослых кур. Достоинство этого метода в том, что в крови обнаруживают лейкозный вирус независимо от антигенных его особенностей.
РИФ-тест по Г. Рубину основан на феномене — родственный возбудителю саркомы Рауса вирус лейкоза кур действует как резистентность индуцирующий фактор (РИФ), т. е. проявляется явление интерференции между вирусами лейкоза и вирусом саркомы Рауса. Сущность реакции в том, что в культуру фибробластов эмбрионов кур вносят материал, исследуемый на вирус лейкоза, и дополнительно инфицируют культуру вирусом саркомы Рауса.
Если после этого в культуре фибробластов эмбрионов кур (ФЭК) отсутствуют очаги (бляшки) трансформации клеток, то куры считаются носителями вируса лейкоза. РИФ-тест считается положительным, если в испытуемой культуре ФЭК число фокусов бласттрансформации в 10 раз меньше, чем в контроле. Этот метод сложный, технически трудновыполнимый. Первые два метода позволяют выяснить эпизоотологическую ситуацию по лейкозам кур в птицеводческих хозяйствах.
Непрямой метод флуоресцирующих антител позволяет определить антиген вируса лейкозов (гемобластозов) в зараженных фибробластах.
Испытываемый препарат обрабатывают сывороткой хомяка, у которое индуцирована опухоль вирусом саркомы Рауса. Использование флуоресцирующей гипериммунной сыворотки кролика или козы позволяет после предварительного воздействия на препарат видоспецифической сывороткой кур определить групповую принадлежность вируса к антигенным подгруппам в инфицированных фибробластах.
Прямой метод флуоресцирующих антител. В основу метода положена серологическая реакция «антиген + флуоресцирующие антитела». Флуоресцирующие тела — голубиные иммунные глобулины, меченные изоционатом флуоресцина. В качестве антигена используют культуру фибробластов куриных эмбрионов.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с препаратом для диагностики лейкозов птиц (ПДЛП) — чувствительный метод диагностики лейкозов.
Патоморфологическая диагностика. При вскрытии трупов кур, павших от гемобластозов (лейкозов), и при послеубойном осмотре тушек обнаруживают увеличение печени, селезенки, почек, фабрициевой сумки. Опухолевые образования встречаются на серозной оболочке грудобрюшной полости, кишечника, желудка, в яичнике, легких, сердце, скелетных мышцах.
Во многих случаях при гемобластозах, особенно при гистиоцитарной и лимфоидной формах, органы усеяны серовато-белыми узелками. Поверхность органа гладкая, блестящая или бугристая. На серозной оболочке грудобрюшной полости, различных отделов желудка и кишечника обнаруживают многочисленные новообразования. Плотные, а иногда несколько дряблые на ощупь, они на разрезе белого цвета, однородны и гомогенны. При миелоидном лейкозе опухолевые разрастания желтовато-белые. При эритроидном лейкозе органы увеличены только диффузно, цвет их вишнево-красный.
В случаях гемобластозов обращают внимание на увеличенную печень, масса которой достигает 400—600 г и более, в связи с чем занимает всю грудобрюшную полость, имеет очаговые или диффузные опухолевые разрастания белого цвета и довольно плотную консистенцию.
Селезенка при всех формах гемобластозов по степени и характеру патологоанатомических изменений различна. Во многих случаях она сильно увеличена, достигает размера крупного грецкого ореха, окрашена диффузно в серо-красный или красно-коричневый цвет, под капсулой и в толще паренхимы содержатся различной величины и формы саловидные узелки серо-белого цвета. Почки резко увеличены, окрашены диффузно в серобелый цвет, очаговые разрастания опухолей белого цвета, плотной консистенции. В яичниках — опухолевые разрастания, они увеличены, серо-белого цвета, напоминают цветную капусту.
Дифференциальная диагностика. По макроскопической картине различные формы лейкозов во многом сходны с поражениями органов при болезни Марека, саркомах, карциномах, туберкулезе, колигранулематозе, гепатитах, пуллорозе и мочекислом диатезе (подагре) птиц. В связи с этим для дифференциальной диагностики гемобластозов от указанных болезней В.П. Зеленским, Л.Г. Бурбой, А.А. Бикорюковым, Т.П. Кудрявцевой, А.П. Палановым разработаны методические указания (табл. 9).
Информационный некоммерческий ресурс handcent.ru © 2022
При цитировании и использовании любых материалов ссылка на сайт обязательна