Постановка реакции иммунодиффузии (часть 1)

Лиофилизированный антиген и контрольную сыворотку разводят трис-буфером (объем буфера, необходимый для разведения компонента, указан на каждой партии антигена и сыворотки) и разливают, как указано на рис. 15. Антиген вносят в центральную лунку, две диаметрально противоположные лунки заполняют контрольной сывороткой, а оставшиеся четыре периферические лунки — испытуемыми сыворотками. Для каждой пробы сыворотки используют отдельную пипетку. После заполнения всех лунок чашки закрывают крышками и помещают в закрытую камеру при комнатной температуре (18—27°С).

Реакцию учитывают через 48—72 ч. Чашки просматривают на темном фоке, направляя сфокусированный луч осветителя ка дно чашки под углом 30—45°. Реакцию оценивают по контрольной линии преципитации; если она отсутствует или слабо выражена, то реакцию следует повторить. Линия преципитации, формируемая контрольной сывороткой и антигеном, должна быть четкой, иметь форму прямой, концы которой должны доходить до лунок с испытуемыми сыворотками; располагаться на одинаковом расстоянии от лунок с антигеном и контрольной сывороткой.
Оценка результатов реакции:
- отрицательная сыворотк а (рис. 15, 1) — контрольная линия преципитации продолжается до лунки с испытуемой сывороткой без загибов или с небольшим загибом в сторону лунки с контрольной сывороткой;
- положительная сыворотка (рис. 15, 2) — между лунками с антигеном и испытуемой сывороткой образуется полоса преципитации, соединяющаяся с контрольной линией;
- слабоположительная сыворотка (рис. 15, 3) — линия преципитации между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном отсутствует, но контрольная линия образует вблизи с испытуемой изгиб, направленный в сторону лунки с антигеном;
- положительная сыворотка со второй линией преципитации (рис. 15, 4) — иногда положительная сыворотка дает вторую линию преципитации, располагающуюся ближе к лунке с испытуемой сывороткой, что указывает на наличие в такой сыворотке антител ко второму антигену (р24) онкорнавируса крупного рогатого скота;
- резкоположительная сыворотка (рис, 15, 5) — контрольная линия значительно укорочена со стороны лунки с испытуемой сывороткой и имеет размытый загиб к лунке с антигеном или образуется линия преципитации, расположенная близко от лунки с антигеном. Более четкие линии преципитации формируются, если такую сыворотку развести 1:4 или 1:8;

• Иммунодиагностика
• Гистологическая диагностика (часть 4)
• Гистологическая диагностика (часть 3)
• Гистологическая диагностика (часть 2)
• Гистологическая диагностика (часть 1)
• Лейкозы
• Патоморфологическая диагностика (часть 2)
• Патоморфологическая диагностика (часть 1)
• Диагностика гемобластозов от реактивных лимфаденопатий (часть 2)
• Диагностика гемобластозов от реактивных лимфаденопатий (часть 1)